3.3 反义RNA技术
反义RNA技术指利用基因重组技术，构建人工表达载体，使其体外或体内表达反义RNA，从而抑制靶基因的表达。其作用原理有：①与前mRNA结合，影响mRNA的成熟和在胞浆内转运；②与相应的靶RNA结合从而激活RNase,加速靶RNA的降解；③直接与起始密码子AUG结合而阻止转录的启动；④互补作用于SD编码区的反义RNA可阻止核糖体在mRNA上的移动。Gao等分别把携有MDR1、MRP反义RNA的逆转录病毒导入阿霉素选择出的人NSCLC细胞株GAOK，细胞对阿霉素、长春花碱、秋水仙碱的耐药程度减少40％-50%，而共转染MDR1和MRP反义RNA后发现，p-gp、MRP的表达分别减少64％和93％，对上述化疗耐药程度减少97％左右。实验提示p-gp、MRP在GAOK细胞株耐药过程中共同起作用，共转染两者的反义RNA可协同逆转耐药。
3.4 核酶技术
核酶是一类具有酶活性的RNA分子，由Cech等首次发现，它能特异性地识别mRNA中的GUC序列，并催化RNA的剪接和剪切反应，这种作用无需能量就能使RNA被降解，使之无法进行转录和翻译，而且催化效率很高，一分子核酶可切割多分子的靶RNA，自身不被消耗可重复使用。核酶的基因组成分两部分：中间的极为保守的核苷酸序列（活性中心）和两端的引导序列。引导序列与靶RNA互补结合时，中间保守序列即在该特定位点切断，从而具有高度特异性。另外，核酶不编码蛋白质，无免疫原性。由于其高效率、高特异性、少副作用的特点，核酶在基因治疗中倍受青睐，被誉为"分子剪刀"和"分子外科"，在抗HIV、抗病毒和治疗白血病及肿瘤方面得到了广泛的应用。Chen等用mdr1核酶导入A549／R对mdr1 mRNA进行剪切，观察到mdr1 mRNA减少，p-gp表达下降，细胞对阿霉素敏感性增加200倍。GAO 等用逆转录病毒介导的MDR1核酶来抑制p-gp在耐药的肿瘤细胞系GAOK／DOX的表达。Kobayashi用MDR1核酶来逆转急性淋巴细胞白血病细胞的耐药性，结果药物敏感性增加了700倍。值得指出的是，逆转录病毒由于其可产生高效价病毒，具有高感染效率，可感染许多种细胞，且对宿主细胞无害而在基因逆转方面具有潜在优势。目前，反义核酸药物的开发也是最有前景的项目之一，但事实上仍有许多问题待解决：①寡聚物易被降解（经过化学修饰的类似物也可在体内缓慢清除）；②细胞摄取的效率有待提高；③寡聚物的非特异结合降低了其效率；④对mRNA的非特异阻断（可能由于寡聚物同DNA序列能形成部分或暂时的碱基配对）。
3.6 细胞因子基因
Stein等研究发现一些细胞因子如TNF、IFN和IL-2可降低MDR1基因mRNA和p-gp的表达水平，增加细胞对药物的敏感性。但细胞因子静脉应用副作用极大，因此他们将细胞因子基因转入肿瘤细胞，结果显示可明显降低MDR1 mRNA 和p-gp的表达水平，使细胞内药物浓度提高。AKI等[65]在研究肝细胞癌细胞系（HepG2,HuH7，SK-Hep-1）时发现,IFN-α和顺铂（CDDP）联用时，可降低MDR1、MRP、TOPO IIα和TOPO IIβ基因在HepG2中的表达；降低MDR1和GST-π基因在SK-Hep-1中的表达,从而可增加耐药细胞系对顺铂（CDDP）的敏感性。这提示我们，联合应用CDDP和IFN-α来治疗进展期肝癌可能具有一定的临床价值。
3.7 间接对抗MDR的基因治疗
将一些耐药基因（如MDR1、MRP等）转移至造血干细胞［66］，以降低化疗药物对骨髓的毒性，这样就可能用高剂量的药物杀伤肿瘤细胞而不破坏骨髓细胞，间接解决耐药的问题。体外实验表明,将MDR1基因转移至小鼠的正常骨髓细胞,可提高化疗剂量而不增加骨髓毒性[67,68].根据前临床研究结果，荷兰学者提出将MDR1基因转移至大计量化疗后无法治愈的肿瘤患者的造血干细胞开展临床I期的研究。通过临床I期研究主要想解决几个问题：①MDR1基因转移至骨髓造血细胞后是否可使CD34＋细胞MDR表达增加；②回输转染MDR1的细胞后是否可使造血重建；③是否具有长期重建造血的功能；④对于化疗引起的骨髓抑制是否具有保护作用。如果I期临床试验能获得令人满意的结果，这个方案将进入II期试验，即加大化疗计量，观察对骨髓的保护效应。除MDR基因外，二氢叶酸还原酶（mDHFR）、MGMT、GST及醛脱氢酶（ALDH）等也被用于肿瘤耐药基因的研究。
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